TD1 de génétique bactérienne

Exercice I : TAUX DE MUTATION

Soit une culture d'E.coli, sensible à la streptomycine, dont la dilution 10^-7, étalée à raison de 0,1 ml sur un milieu gélosé en boîte de Pétri, donne après incubation, 10 colonies.

1) 0,1 ml de cette culture est étalé sur un milieu gélosé additionné d'un antibiotique, la streptomycine, à une dose supérieure à la CMI. Après incubation, la boîte de Pétri montre 4 colonies.

Quel est le phénotype de ces quatre colonies ?

Quel est le taux de mutation des résistants à la streptomycine ?

2) La culture initiale est traitée par un agent mutagène, la nitrosoguanidine, puis étalée comme précédemment à raison de 0,1 ml sur le même milieu gélosé à la streptomycine (GN + Stp). Après incubation, la boîte de Pétri montre 40 colonies.

Combien de germes bactériens traités à la nitroso-guanidine a t-on déposé sur la GN + Stp ?

Calculez le taux de mutation (Tm2) des résistants. Comparez cette valeur à celle trouvée précédemment et conclure

II: MUTANTS DÉFICIENTS (AUXOTROPHES)

Six clones d'E.coli numérotés de 1 à 6, sont cultivés sur milieu minimum MM additionné de thréonine (Thr), leucine (Leu), Phénylalanine (Phe) et cystéine (Cys), puis repiqués par la technique du tampon de velours sur huit milieux minima MM diversement additionnés d'un ou de plusieurs de ces quatre acides aminés, comme indiqué sur la figure. Les clones qui poussent sur les boîtes de Pétri sont indiqués par leurs numéros.

Indiquer quels sont les phénotypes qui correspondent à ces 6 clones